Optimización de la producción de enzimas celulasas obtenidas de hongos xilofagos aislados de madera en descomposición

Abstract

La finalidad de este Trabajo Especial de Grado es optimizar la producción de enzimas celulasas obtenidas de hongos xilófagos de madera en descomposición. El primer paso en la experimentación de este trabajo, se basó en la obtención de aislados fúngicos a partir de madera en descomposi ción, con la finalidad de rea lizar pruebas preliminares para conocer cuál de éstos poseía la mayor capacidad celulolítica . Se lograron obtener 6 aislados fúngicos con capacidad celulolitica, de los cuales, el aislado 1 fue capaz de d egradar la celulosa del lodo papelero en mayor medida 0,0148 ± 0,01140 μ moles de glucosa/mL.h , el cual fue utilizado en los subsiguientes ensayos, donde se evaluó el efecto de la variaciones de las condiciones de cultivo del hongo. Se obtuvo que l a s mejores condiciones para la obtención de las mayores actividades celulasa son : sustrato disgregado; concentración de lodo papelero al 3% p/v; sales minerales Nutrisol P® y Nutrisol K® al 3 % p/v de cada una; medio sin modificación de pH (pH 3); tiempo óptimo de incubación fermentativa en agitación entre 168 y 264 horas; incubación postfermentativa (40ºC, sin agitación) entre 96 y 120 h; temperatura de incubación postfermentativa (sin agitación) a40°C. Obteniendo un rendimiento de actividad celulasa de 0,1355±0,0027 μmoles de glucosa/mL.h . A partir d e los cultivos sumergidos obtenido s de las condiciones óptimas para la obtención de las enzimas celulasas , se realizo una precipitación de enzimas, para concentra r el pool enzimático obtenido, y así obtener un producto semicomercial concentrado , con el volumen requerido para su uso y faci litar su trasporte y almacenamiento. Para obtener el precipitado de enzimas se utilizó etanol a diferentes concentraciones , encontrándose que fue más eficiente la precipitación en los tratamientos con 25% y 50% de etanol Palabras claves Precipitación, lodo papelero, celulolitica , enzimática