Establecimiento del sistema de embriogénesis somática en Azadirachta indica A. Juss a partir de suspensiones celulares, acoplado a la producción de azadiractina in vitro

Abstract

El neem ( Azadirachta indica A. Juss) es una especie vegetal leñosa perte neciente a la f amilia Meliaceae. Esta ha sido descrita como un “árbol mu ltipropósito” debido a su aprovechamiento en diversas áreas, especialmente , gracias a la presencia del metabolito se cundario azadiractina. Este metabolito, ún icamente sintetizado por esta especie , presenta un gran interés agrícola debido a sus propiedades insecticida s . Problemas asociados tanto al cultivo en campo de la planta, como a la extracción de la azadiractina, han hecho necesaria la búsqueda de métodos alternativos de propagación y extracció n de los metabolitos secundarios del neem , fundamentados en la biotecnología. Se evaluó entonces la diferenciación de embriones somáticos , a partir de suspensiones celulares de callos embriogénicos de cotiledón y hoja, expuestas a distint as concentraciones de cito c inin a (BAP) y auxinas (2,4 – D y AIA), y a un agente estresante (cultivo sin recambio de medio ); p or otra parte, se evaluó la producción de azadiractina a partir de callos no embriogénicos de hoja en suspen sión, determinando el efecto de distintas p r oporciones de nitrato/ amonio del medio MS y de dos sustancias precursoras ( acetato de sodio y escualeno ) . Se logró la formación de embriones somáticos ( 45 embriones/ frasco) en un medio con 2 mg/L de BAP y 1 mg/L de AIA, sometido a estrés, luego de 5 meses de cultivo. Por otra parte, se logró la máxima síntesis de aza diractina ( 52,53 mg/L) a los 14 días de cultivo, empleando un medio MS de tipo nítrico, y aplicando el acetato de sodio y e scualeno en simultaneo , a 10 mg /L cada precursor . Palabras clave: Estrés , n eomorfos , n itrato , p recursores , r egeneración .